產品(pǐn)中心
人(rén)體(tǐ)細胞
|
細(xì)胞(bāo)名(míng)稱 |
規(guī)格(gé) |
價格(gé) |
編號 |
|
HCC-78（人(rén)肺(fèi)腺癌細胞(bāo)） |
株(zhū) |
1株(zhū)/3800元 |
YS-X786 |
細(xì)胞名(míng)稱：HCC-78（人肺腺癌細胞）
傳代(dài)方(fāng)法：第(dì)一次建議(yì)1:2
傳(chuán)代(dài)情況 ：2~3天(tiān)換液
凍存(cún)條(tiáo)件：無血(xiě)清(qīng)凍存液
細胞(bāo)描述(shù)：本(běn)庫的(dí)細(xì)胞(bāo)僅用於科研工作，未經許可(kě)不得(dé)用於其他目的，使(shǐ)用(yòng)者(zhě)不得(dé)將本(běn)庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給(gěi)第(dì)三(sān)者。
細胞(bāo)備(bèi)注(zhù)： 用(yòng)無菌(jūn)離心管收集(jí)瓶(píng)子培(péi)養基，留作過(guò)渡培(péi)養
細(xì)胞(bāo)服務內容(róng):
1，協(xié)助引進(jìn)科研急需(xū) 的(dí)細胞株(zhū)/係。
2，提(tí)供(gōng)細胞(bāo)保藏服(fú)務(wù)。
3，提供細胞供(gōng)應(yīng)服務。
4，提(tí)供(gōng)細(xì)胞篩選或建(jiàn)立特殊細(xì)胞(bāo)株/係(xì)的服(fú)務(wù)。
5， 提供與(yǔ)細胞培養(yǎng)配套的(dí)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)
6， 提供(gōng)支原(yuán)體等(děng)各項(xiàng)檢測的技(jì)術(shù)服務(wù)
培養步驟(zhòu)：
1）復(fù)蘇細胞：將含(hán)有(yǒu)1mL細(xì)胞懸(xuán)液的凍存管在37℃水浴中迅速(sù)搖晃解凍，加入(rù)5mL培養(yǎng)基混合(hé)均匀。在1000RPM條件(jiàn)下(xià)離心5分鐘，棄去(qù)上清液(yè)，補(bǔ)加(jiā)4-6mL完全培(péi)養(yǎng)基後吹匀(yún)。然(rán)後(hòu)將所有細(xì)胞懸液(yè)加(jiā)入培養(yǎng)瓶中培(péi)養過夜（或將細胞懸液加(jiā)入6cm皿(mǐn)中），培養(yǎng)過夜(yè)。第二天換液(yè)並(bìng)檢查細胞密(mì)度。
2）細(xì)胞傳代(dài)：如果細胞(bāo)密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1，對於貼壁細胞，傳(chuán)代(dài)可參(cān)考以下方(fāng)法：
1. 棄去(qù)培養上清，用(yòng)不含鈣，鎂(měi)離子的(dí)PBS潤(rùn)洗細胞1-2次。
2. 加(jiā)1-2ml消(xiāo)化液(yè)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，置於37℃培(péi)養(yǎng)箱中(zhōng)消化1-2min，然(rán)後(hòu)在(zài)顯(xiǎn)微(wēi)鏡下觀察(chá)細(xì)胞消(xiāo)化情(qíng)況，若(ruò)細胞大部分(fēn)變圓(yuán)並(bìng)脫落(là)，迅(xùn)速拿回操作(zuò)台，輕(qīng)敲幾下培(péi)養(yǎng)瓶後加5ml以上(shàng)含10%血清的完(wán)全(quán)培(péi)養基(jī)終(zhōng)止消化(huà)。
3.輕(qīng)輕吹(chuī)打細(xì)胞(bāo)，完(wán)全脫落後吸出，在(zài)1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄(qì)去上(shàng)清(qīng)液，補加(jiā)1-2mL培(péi)養液(yè)後(hòu)吹(chuī)匀。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液(yè)，將細胞懸(xuán)液按(àn)1：2到(dào)1：5的(dí)比例(lì)分到(dào)新(xīn)的(dí)含(hán)5-6 ml培(péi)養液(yè)的(dí)新皿(mǐn)中(zhōng)或(huò)者(zhě)瓶中。
2，對(duì)於懸浮細(xì)胞，傳代可參考以(yǐ)下方法：
方法一(yī)：收集細胞，1000RPM條件下(xià)離心8-10分(fēn)鐘，棄(qì)上(shàng)清(qīng)液(yè)，補(bǔ)加(jiā)1-2ml培(péi)養(yǎng)液後吹匀，將細胞懸(xuán)液(yè)按(àn)1:2到(dào)1:5的比例分(fēn)到新的(dí)含(hán)8ml培養基的新(xīn)皿中或瓶(píng)中。
方法三(sān)：可選(xuǎn)擇半數換液(yè)方(fāng)式(shì)，棄半(bàn)數(shù)培養基後，將剩(shèng)餘細胞懸起，將細胞懸(xuán)液按(àn)1:2到1:3的(dí)比例(lì)分到新的(dí)含8ml培(péi)養(yǎng)基新皿中或(huò)者(zhě)瓶中。
