蝦補體4(C4)酶聯免疫(yì)分(fēn)析試(shì)劑(jì)盒操作(zuò)步驟:

加樣：分(fēn)別(bié)設(shè)空白孔（空(kōng)白(bái)對照(zhào)孔不(bù)加(jiā)樣品及酶標試劑(jì)，其(qí)餘(yú)各步操作相同），標準孔，待測(cè)樣品(pǐn)孔。在酶標(biāo)包被(bèi)板(bǎn)上標準品準確(què)加(jiā)樣50μl，待測樣品孔(kǒng)中(zhōng)先加樣品(pǐn)稀釋(shì)液40μl，然後再加(jiā)待測樣品10μl（樣(yàng)品最(zuì)終(zhōng)稀釋(shì)度為5倍）。加樣(yàng)將樣品加於酶(méi)標板孔(kǒng)底(dǐ)部，盡量(liáng)不觸及(jí)孔(kǒng)壁，輕輕晃(huǎng)動混(hùn)匀。

3.溫(wēn)育：用封(fēng)板(bǎn)膜(mó)封板後(hòu)置37℃溫育30分鐘。   

4.配(pèi)液：將30倍濃縮洗滌(dí)液(yè)用(yòng)蒸餾(liù)水30倍稀釋(shì)後備用(yòng)

5.洗滌：小心揭(jiē)掉封(fēng)板膜，棄(qì)去(qù)液體，甩幹，每(měi)孔加滿洗(xǐ)滌液，靜(jìng)置30秒後(hòu)棄(qì)去(qù)，如(rú)此重復(fù)5次，拍(pāi)幹。

6.加(jiā)酶：每孔加(jiā)入酶(méi)標(biāo)試劑(jì)50μl，空(kōng)白孔除外。 

7.溫育：操作同(tóng)3。

8.洗(xǐ)滌：操作同5。

9.顯(xiǎn)色：每孔(kǒng)先(xiān)加入顯色(sè)劑(jì)A50μl，再(zài)加入(rù)顯色劑(jì)B50μl，輕輕震(zhèn)蕩(dàng)混(hùn)匀(yún)，37℃避光(guāng)顯色15分鐘.

10.終(zhōng)止：每孔加終(zhōng)止(zhǐ)液(yè)50μl，終止反應(yīng)（此(cǐ)時(shí)藍(lán)色立(lì)轉黃色）。

11.測定：以空白空調(tiáo)零，450nm波(bō)長依序測量各(gè)孔(kǒng)的(dí)吸(xī)光(guāng)度（OD值(zhí)）。 測(cè)定應在(zài)加終止(zhǐ)液後15分(fēn)鐘以內進行。