人基質金(jīn)屬(shǔ)蛋(dàn)白酶9ELISA 標準(zhǔn)品檢測前(qián)準備(bèi)工作:
1.請(qǐng)提前20分鐘(zhōng)從(cóng)冰箱中取出試(shì)劑盒，平衡(héng)至(zhì)室(shì)溫。
2.將濃縮洗滌(dí)液用雙(shuāng)蒸水稀(xī)釋(shì)(1:25)。未(wèi)用完(wán)的(dí)放(fàng)回(huí)4℃。從冰(bīng)箱(xiāng)中取出的濃(nóng)縮(suō)洗滌(dí)液(yè)可(kě)能有結 晶，屬於正常現象(xiàng)，可用(yòng)40℃水(shuǐ)浴(yù)微加熱使(shǐ)結晶(jīng)完(wán)全溶解後再配製(zhì)洗(xǐ)滌(dí)液（加(jiā)熱溫(wēn)度(dù)不要超(chāo) 過(guò)50℃，使用(yòng)時洗(xǐ)滌液應為室溫(wēn)）。當日(rì)使(shǐ)用(yòng)。

1.)使用(yòng)前將(jiāng)所有的試(shì)劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑(jì)不能直接(jiē)在(zài)37oC溶解。
2.)標(biāo)準品(pǐn)(凍幹品)：每瓶標(biāo)準品(pǐn)加入標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)稀釋液1mL，蓋好後(hòu)室溫(wēn)靜(jìng)置(zhì)大約(yuē)10分鐘(zhōng)，同(tóng)時反復顛倒/搓動以助溶(róng)解，其濃度(dù)為(wéi)1000pg/mL。準備(bèi)7個稀(xī)釋(shì)標準(zhǔn)品的(dí)EP管(guǎn)，每個(gè)EP管中(zhōng)加入(rù)150μL的(dí)標準品(pǐn)稀(xī)釋液(yè)，如圖(tú)所示依(yī)次倍比稀釋成(chéng)不同(tóng)的(dí)梯(tī)度,標準(zhǔn)品(pǐn)稀(xī)釋液(yè)(0pg/mL)直接(jiē)作為空白(bái)孔。人(rén)腫瘤壞(huài)死因子(zǐ)α(TNFα)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)為(wéi)保證(zhèng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)有效(xiào)性(xìng)，每(měi)次實(shí)驗(yàn)請使用(yòng)新(xīn)的標準品(pǐn)溶(róng)液。
4.生物(wù)素化(huà)抗體工作液(yè)：實驗(yàn)前計(jì)算當次實(shí)驗(yàn)所(suǒ)需用(yòng)量（以(yǐ)100μL/孔(kǒng)計），實際(jì)配(pèi)製時(shí)應(yīng)多配 製(zhì)100-200μL。使用前(qián)15分鐘，以生物(wù)素化抗(kàng)體(tǐ)稀釋液(yè)稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作(zuò) 濃度。當日(rì)使用。
5.酶(méi)結合物(wù)工作液(yè)：實(shí)驗(yàn)前計算(suàn)當(dāng)次實驗所需用(yòng)量（以100μL/孔(kǒng)計(jì)），實際配(pèi)製(zhì)時應多配製 100-200μL。使(shǐ)用前15分(fēn)鐘，以(yǐ)酶(méi)結合物稀(xī)釋液(yè)稀釋(shì)濃(nóng)縮HRP酶結合物(1:100)成(chéng)工作濃度。