產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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戈氏(shì)放綫菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Actinomyces gerencseriaePCR |
YS-P013783 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存不當或試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能下降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與保守(shǒu)性。
戈氏放(fàng)綫(xiàn)菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行，結合的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要用同位素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒或(huò)細菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
