產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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阿菲(fēi)波(bō)菌屬通用PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Afipia spp.PCR |
YS-P013796 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴增曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
阿(ā)菲(fēi)波(bō)菌(jūn)屬通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫度下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保持很高(gāo)的正確度。再通過選擇(zé)特異(yì)性和保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本如血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
