產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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豬瘟(wēn)病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Classical Swine Fever Virus(CSFV)RTPCR |
YS-P014023 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴增部分的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保守性(xìng)。
豬瘟(wēn)病毒PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫度下進行(háng)，結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基因區，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般用(yòng)電泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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