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產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
|
嗜(shì)人錐(zhuī)蠅PCR檢測試劑盒(hé) |
Cochliomyia hominivoraxPCR |
YS-P014043 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次(cì)實驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
嗜(shì)人錐蠅PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的正確結合是關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下進行，結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能(néng)保持很高的正(zhèng)確度。再通過選擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要用同位素，無(wú)放射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
