產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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牛痘(dòu)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Cowpox Virus(CPV)PCR |
YS-P014063 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守性(xìng)。
牛(niú)痘病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進行，結合的特異(yì)性大(dà)大增加，被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基(jī)因區，其特異性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求低
不需要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
