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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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登革(gé)病毒(dú)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Dengue Virus(DENV)RTPCR |
YS-P014089 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的有效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上要求需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一次(cì)，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為陽(yáng)性，否則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守性(xìng)。
登革病(bìng)毒通(tōng)用(yòng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇特異(yì)性和保守性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
- 上一條：革(gé)蜱(pí)PCR檢測試劑盒(hé)
- 下(xià)一條：登革病(bìng)毒型PCR檢測試劑(jì)盒
