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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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鴨腺病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Duck AdenovirusPCR |
YS-P014103 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
鴨(yā)腺(xiàn)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與模板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下進(jìn)行，結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其特異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以指數(shù)方式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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