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PCR檢測(cè)試劑盒
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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雞減蛋(dàn)綜(zōng)合征病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Egg Drop Syndrome Virus1976(EDSV76)1976PCR |
YS-P014117 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年
貨期(qī):現貨PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期一般為1年,這是(shì)指在適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本;對於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復核一(yī)次,若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判定(dìng)為陽性,否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指數擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能下降,可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實(shí)性;
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
雞減(jiǎn)蛋綜合征(zhēng)病(bìng)毒PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引物的結(jié)合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行,結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加,被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也(yě)就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區,其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的(dí),能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細胞;在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位);在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般(bān)用電泳分析,不一定要用(yòng)同位素,無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養細胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
- 上(shàng)一(yī)條(tiáo):同艾(ài)特(tè)韋(wéi)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
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