產品中心
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
|
馬皰(pào)疹(zhěn)病(bìng)毒通用(yòng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Equine Herpesvirus(EHV)PCR |
YS-P014165 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指在(zài)適當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議復(fù)核一次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性與保守性。
馬皰疹(zhěn)病(bìng)毒通用PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物與模板的結合及(jí)引物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應(yīng)中模板與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或細菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
