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產品(pǐn)中心
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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皮(pí)炎外瓶黴PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Exophiala dermatitidisPCR |
YS-P014185 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗中同時滿足，否則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配製不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
皮炎外(wài)瓶(píng)黴PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合(hé)的特異性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增的靶基因片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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