產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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大(dà)擬(nǐ)片形(xíng)吸(xī)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Fasciola magnaPCR |
YS-P014188 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光保存,避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效期:一(yī)年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年,這是(shì)指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性,有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實(shí)驗中同時滿足(zú),否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本;對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一(yī)次,若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性,否則判定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降,可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
②鹼基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
大(dà)擬(nǐ)片(piàn)形(xíng)吸(xī)蟲PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性,使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行,結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加,被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數(shù)方式增加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應,一般在2~4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析,不一定(dìng)要用同位(wèi)素,無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液,體腔液,洗嗽液(yè),毛(máo)發,細(xì)胞,活PCR技術概論。
- 上(shàng)一條:大(dà)片吸(xī)蟲(chóng)通用PCR檢測試劑盒
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