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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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貓(māo)白血病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Feline Leukemia Virus(FeLV)PCR |
YS-P014193 |
分類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避光。
有效期(qī):一(yī)年
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú),否則該次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本;對於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次,若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期,則判定(dìng)為陽性(xìng),否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環境汙染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品交叉(chā)汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng),可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與保守性。
貓(māo)白血(xiě)病毒PCR檢測試劑盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼基配對(duì)原則的。聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下(xià)進行,結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區,其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞;在病毒的檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi));在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶(méi),一次性地將(jiāng)反應(yīng)液加好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸反應(yīng),一般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不(bù)一定(dìng)要用同位素,無放射性汙(wū)染(rǎn),易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液,體腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
