產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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弗朗(lǎng)西(xī)斯菌通用PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Francisella spp.PCR |
YS-P014211 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建議(yì)復核一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期(qī)，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢測效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守性。
弗(fú)朗(lǎng)西斯(sī)菌(jūn)通用(yòng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與模板的(dí)正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性(xìng))可以在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也就能保持很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成量是(shì)以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
