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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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鴨(yā)源(yuán)雞杆菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Gallibacterium anatisPCR |
YS-P014223 |
分類(lèi):PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸:低溫,避光。
有(yǒu)效期(qī):一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質控品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果應為陽性,有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要求需在一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該次實驗視(shì)為無效。
2.可疑:有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本(běn);對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì),若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否則判定為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染,試(shì)劑汙(wū)染,樣品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽性結(jié)果;
2. 試劑運輸(shū),保存(cún)不當或試(shì)劑配製不準確引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降,可能會導致出(chū)現假陰性結(jié)果(guǒ)。
②鹼基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性。
鴨源雞(jī)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng),使反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度下進行,結合的特(tè)異性大大增(zēng)加,被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶基因區,其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指數方(fāng)式增加(jiā)的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一(yī)個靶細胞(bāo);在病毒的檢測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析,不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn),易推廣。
(4) 對標本的純度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發(fā),細胞,活(huó)PCR技術(shù)概論。
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