產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
戈(gē)爾(ěr)迪(dí)勒病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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戈爾迪勒病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Gordil VirusRTPCR |
YS-P014239 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一(yī)年(nián)
貨期:現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián),這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正常(cháng)陰性質控品擴增曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則該次實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本(běn);對於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復核一次,若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī),則判(pàn)定為陽性,否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性(xìng):無指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降,可能會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
戈爾(ěr)迪勒(lè)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模板與引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大(dà)大增加,被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區,其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成量(liáng)是以指數方(fāng)式增(zēng)加的,能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi));在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一般在(zài)2~4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般用電泳分析(xī),不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨床標本如(rú)血液,體腔液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技(jì)術概(gài)論。
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