產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
草魚呼腸孤病毒(dú)毒通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
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2024-3-14 瀏覽(lǎn)次數(shù)：703
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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草魚呼腸(cháng)孤病毒毒通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Grass Carp Reovirus(GCRV)RTPCR |
YS-P014241 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗中同時滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉汙染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效能下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
草(cǎo)魚呼腸孤病毒(dú)毒通(tōng)用(yòng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正確(què)結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選擇(zé)特異性和保守性高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以指數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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