產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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流(liú)感嗜(shì)血杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Haemophilus influenzaePCR |
YS-P014255 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光(guāng)。
有效(xiào)期:一年(nián)
貨(huò)期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年,這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下,產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct值應(yīng)小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次實驗中同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為無效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本(běn);對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次,若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下降,可能會(huì)導致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基因的特異(yì)性與保守性(xìng)。
流(liú)感嗜(shì)血(xiě)杆菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物與模(mó)板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性,使反應中模板與引物的(dí)結(jié)合(復性)可以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行,結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加,被擴增的(dí)靶基因片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區,其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指數方式增(zēng)加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一(yī)個靶細胞;在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行變性-退火-延(yán)伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素,無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要求低(dī)
不需要分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術(shù)概(gài)論。
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