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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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高地病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Highlands J VirusJRTPCR |
YS-P014289 |
分類:PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存,避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避(bì)光。
有效(xiào)期(qī):一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一(yī)般為1年,這是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢測結果應為(wéi)陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足,否則該次實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本;對於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一次(cì),若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則判定(dìng)為陽性,否則判(pàn)定為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸(shū),保存不(bù)當或試劑(jì)配製不準確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng),可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性。
高地(dì)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引物與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度下進行,結(jié)合的(dí)特異性大大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性高的(dí)靶基因區,其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的,能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞;在病毒的(dí)檢測(cè)中,PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位);在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性(xìng)地將反應(yīng)液加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析,不一(yī)定要(yào)用同位素,無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不需要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術概論(lùn)。
