產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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組織(zhī)胞(bāo)漿菌通用(yòng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Histoplasm spp.PCR |
YS-P014293 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為1年，這是指在適當的儲存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
組織胞(bāo)漿(jiāng)菌通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基(jī)配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高的正確度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶基因區，其(qí)特(tè)異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性-退火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本(běn)如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
