產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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人(rén)皰疹病(bìng)毒(dú)通用PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Human Herpesvirus RTPCR |
YS-P014302 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
人皰疹病毒(dú)通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的(dí)結合(復性)可以在較高(gāo)的溫度下進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶基因區，其特(tè)異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
