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PCR檢測(cè)試劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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人偏(piān)肺病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR |
YS-P014310 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低(dī)溫,避(bì)光。
有效(xiào)期:一年
貨期:現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為1年(nián),這是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應為陽性,有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú),否則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯的(dí)指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次,若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期,則判定為陽性,否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰性(xìng):無指數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑汙染,樣品交叉汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸,保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng),可能會導致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
人(rén)偏肺病毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與模板的正確結合(hé)是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以在較高的溫度下(xià)進(jìn)行,結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加,被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單(dān)位);在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一(yī)次性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應,一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè),體腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發,細胞(bāo),活PCR技術概論。
