產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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鮭(guī)魚傳(chuán)染性貧血(xiě)病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Infectious Salmon Anaemia Virus(ISAV)RTPCR |
YS-P014333 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在一次實驗中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
鮭魚傳染性貧血病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應中模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳分析，不(bù)一定要用同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求低
不需(xū)要分離病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
