產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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嬰(yīng)兒(ér)利什(shí)曼蟲(chóng)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Leishmania infantumPCR |
YS-P014366 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該次(cì)實驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
嬰(yīng)兒利(lì)什(shí)曼蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引物與模(mó)板的(dí)正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特異性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素，無放射(shè)性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論。
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