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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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住白細(xì)胞原(yuán)蟲屬(shǔ)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Leucocytozoon spp.PCR |
YS-YS-P014377 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試劑則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因的特異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
住(zhù)白細(xì)胞(bāo)原蟲(chóng)屬通用PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高的靶基因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將反應液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求低
不需(xū)要分離病毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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