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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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馬杜(dù)拉分枝菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé) |
Madurella spp.PCR |
YS-P014394 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或試劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的試劑檢測效能下降，可(kě)能會(huì)導致出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
馬杜(dù)拉(lā)分枝菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術概論。
