產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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馬爾太蟲通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Marteilia spp.PCR |
YS-P014407 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián)，這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽性，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該次實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性；
④靶基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
馬爾太(tài)蟲通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(復性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再通(tōng)過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一般用電(diàn)泳分析(xī)，不一(yī)定要用同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需(xū)要分離病毒或細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
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