產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
|
肺(fèi)炎病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
MetaRTPCR |
YS-P014415 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指在適當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核一次，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
肺(fèi)炎病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行，結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區，其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加(jiā)的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反應液加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產物一般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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