產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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精氨酸(suān)支原體(tǐ)PCR檢測試劑盒 |
Mycoplasma argininiPCR |
YS-P014471 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性與保守(shǒu)性。
精(jīng)氨酸支原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在較高的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的特異性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶基(jī)因區，其特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標本如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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