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PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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人(rén)支(zhī)原體PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Mycoplasma hominisPCR |
YS-P014481 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性。
人支(zhī)原體PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過選擇特異性和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或細菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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