產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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滑液支原體PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Mycoplasma synoviaePCR |
YS-P014491 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑配製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可能會導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保守性(xìng)。
滑(huá)液支原體PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特異性和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般用電泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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