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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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腦膜炎(yán)奈瑟菌群PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Neisseria meningitidis AAPCR |
YS-P014499 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲存條件:-20℃避(bì)光保存,避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一年
貨(huò)期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián),這是指在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下(xià),產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中同(tóng)時滿足,否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn);對(duì)於可疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次(cì),若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保存不(bù)當或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降,可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng);
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保守性。
腦(nǎo)膜(mó)炎(yán)奈(nài)瑟(sè)菌群PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模(mó)板的正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度下進行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特異性大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很高的正確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守性高的(dí)靶基因區,其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的,能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位(wèi));在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性地將反應液加好後,即(jí)在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般用電泳(yǒng)分析,不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù),無放射性汙染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發(fā),細胞,活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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