產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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奈(nài)瑟菌(jūn)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Neisseria spp.PCR |
YS-P014501 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現假陰性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
奈(nài)瑟菌(jūn)通用PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物與模板的(dí)結合及引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中檢出(chū)一個靶細胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定要用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
