產(chǎn)品中心
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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犬新(xīn)孢(bāo)子蟲PCR檢測試劑(jì)盒 |
Neospora caninumPCR |
YS-P014508 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準確(què)引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因的特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
犬(quǎn)新孢(bāo)子蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物與模板的(dí)正確(què)結合是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板的結合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用電泳分析，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
