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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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巴西諾(nuò)卡(qiǎ)菌PCR檢測試劑盒 |
Nocardia brasiliensisPCR |
YS-P014514 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對於可(kě)疑樣本建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定為陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異性與保守性(xìng)。
巴西諾卡菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物與模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞中檢出一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液加好後，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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