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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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馬蘇大(dà)麻哈魚病毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
Oncorhynchus Masou Virus(OMV)PCR |
YS-P014531 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不當或試劑(jì)配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試劑檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
馬蘇大麻哈魚(yú)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引物與模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性大大增加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指數方(fāng)式增加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應液加好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一定要用同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標本如血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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