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PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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羊(yáng)口(kǒu)瘡(chuāng)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Orf Virus(ORFV)PCR |
YS-P014533 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽性，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判定為(wéi)陽性，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當或試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
羊口(kǒu)瘡(chuāng)病毒PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物與模板的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
