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產品中心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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幼蟲芽孢杆菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Paenibacillus larvaePCR |
YS-P014553 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守性。
幼蟲芽孢杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高的正確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概論。
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