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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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黃綠(lǜ)青(qīng)黴PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Penicillium citreoviridePCR |
YS-P014571 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結果應為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
黃綠(lǜ)青黴PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是遵循鹼基配對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性)可以在較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過選擇特異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因區，其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將反(fǎn)應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素，無放射性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床標本如血液，體腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
