產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
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皮(pí)裏(lǐ)陶病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Pirital virus(PIRV)RTPCR |
YS-P014592 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指在適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降，可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
皮裏陶病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正確結合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
