產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
脊髓灰(huī)質(zhì)炎病毒通(tōng)用(yòng)型PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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脊(jǐ)髓灰(huī)質炎病毒(dú)通用型(xíng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Poliovirus(PV)RTPCR |
YS-P014605 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指數擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增期，則判(pàn)定為陽性，否則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
脊(jǐ)髓(suǐ)灰(huī)質(zhì)炎(yán)病(bìng)毒通用型(xíng)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使反應中模(mó)板與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持很高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技術概論。
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