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PCR檢測試劑(jì)盒

豬(zhū)圓(yuán)環病毒(dú)通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)

文字:[大][中(zhōng)][小(xiǎo)] 2024-3-15    瀏(liú)覽(lǎn)次(cì)數(shù):627    
商品(pǐn)屬性(xìng)
產(chǎn)品名稱(chēng) 英文名稱(chēng) 貨號
豬圓(yuán)環病(bìng)毒通用PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
Porcine Circovirus(PCV)PCR
YS-P014608
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避免反復凍融。
運輸:低溫,避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī):一年

貨期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年,這(zhè)是指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般(bān)要貯存於-20℃下,產物(wù)檢測部分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。

【結果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 基綫(Baseline)設定:應(yīng)選(xuǎn)擇該次(cì)實驗指數擴(kuò)增前(qián)所(suǒ)有(yǒu)樣本(běn)熒(yíng)光信號比(bǐ)較(jiào)穩定的一段(duàn)區域(所(suǒ)有樣(yàng)本熒光(guāng)信號(hào)無(wú)較大波動(dòng)),起(qǐ)始點(diǎn)(Start)應(yīng)避開熒光(guāng)采(cǎi)集(jí)起始階(jiē)段(duàn)的信(xìn)號波動(dòng),終(zhōng)止(zhǐ)點(diǎn)(End)應比(bǐ)最(zuì)早(zǎo)出(chū)現(xiàn)指(zhǐ)數(shù)擴增的樣(yàng)本Ct值減(jiǎn)少1~3個循環,建(jiàn)議(yì)基(jī)綫設為6~15。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
1.   陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果應為陰性,無指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct;
2.   陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng),有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期,Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3.   以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
1.   陽(yáng)性(xìng):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī),且Ct<38;
2.可(kě)疑:有明顯的指數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本;對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī),則(zé)判(pàn)定為陽性,否則判定為陰性;
3.   陰(yīn)性:無指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1.   實驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果;

2.   試劑(jì)運輸(shū),保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降,可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果。

PCR反應的特異(yì)性:
   ①引物與(yǔ)模(mó)板DNA特異正(zhèng)確的結(jié)合(hé);
   ②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則;
   ③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性;
   ④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
豬圓環(huán)病毒通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應中模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進行,結合的特異(yì)性大大(dà)增加,被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo);在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應,一般(bān)在2~4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳分析(xī),不一定要用同(tóng)位素,無放(fàng)射性汙染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本如血液(yè),體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽液(yè),毛發(fā),細胞,活(huó)PCR技術概論。
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