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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
變形杆(gān)菌屬通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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變(biàn)形杆菌屬通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Proteus spp.PCR |
YS-P014639 |
分類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有(yǒu)效期:一年(nián)
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年(nián),這是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增部分的(dí)試(shì)劑一般要貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng):將閾值綫設定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本;對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng),否則判定為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染,試(shì)劑(jì)汙染,樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng),可能(néng)會導致出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
變形杆菌屬(shǔ)通用PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性,使反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復性)可以在較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加,被(bèi)擴增的靶基(jī)因片段也就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū),其(qí)特(tè)異性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以指數方式(shì)增(zēng)加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞;在(zài)病(bìng)毒的檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶,一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即(jí)在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分析,不一定要(yào)用(yòng)同位素(sù),無放射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技(jì)術概論。
