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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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普(pǔ)羅(luó)威(wēi)登(dēng)斯菌(jūn)通用(yòng)PCR檢測試劑盒 |
Providencia spp.PCR |
YS-P014646 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本建議復核一次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配製不(bù)準確引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特(tè)異性與保守(shǒu)性(xìng)。
普(pǔ)羅威(wēi)登(dēng)斯(sī)菌通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合是關(guān)鍵。引物與模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較高的溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其(qí)特異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
