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產品(pǐn)中心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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真鯛(diāo)虹彩病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)(PCR |
YS-P014670 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性，有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一(yī)次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異性與保(bǎo)守性。
真鯛虹彩病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與模板的正確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區，其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是以指數方式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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