產品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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羊流產沙門氏(shì)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Salmonella abortus ovisPCR |
YS-P014699 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分的試劑一般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的特異(yì)性與保守(shǒu)性。
羊(yáng)流(liú)產沙(shā)門氏菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大大增加，被擴增的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳分析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
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