產品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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鼻(bí)血吸(xī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Schistosoma nasalePCR |
YS-P014734 |
分類(lèi):PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū):低溫,避光。
有效(xiào)期(qī):一年(nián)
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下,產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性,有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次,若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期,則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng),否則判定為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降,可能(néng)會導致出現假陰性結果。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性;
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
鼻血吸蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng),使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物的(dí)結合(復性(xìng))可以在較高的(dí)溫度下進行(háng),結合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加,被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再通過選擇特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區,其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式(shì)增加的,能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒的檢測中,PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析,不一定要用(yòng)同位(wèi)素(sù),無(wú)放射性汙染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血液,體腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
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