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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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施(shī)馬倫貝(bèi)格(gé)病毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Schmallenberg Virus(SBV)RTPCR |
YS-P014737 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期(qī)，則判定為陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
施馬倫貝格(gé)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被擴增的靶基因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為擴增模板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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